使用方法：
收到细胞小鼠胰岛内皮细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠胰岛内皮细胞现货供应
简称：MS1

种属：小鼠

来源：胰岛内皮细胞；C57BL/6

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0050

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

组织切片清除剂，英文名或英文缩写：HistoChoice clearing agent，级别：3.5N，规格：100克  HumanhepatitisBvirusXAg,HBxAgELISAKit 人病毒X抗原(HBxAg)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Bis-Acrylamide 10g/25g Amresco分装  HumanHaptoglobin,Hpt/HPELISA试剂盒人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

TERRIFICBROTH,POWDER*肉汤, 粉末生物技术级100GRT  组织脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)克林纳(Chinard)比色法定量检测试剂盒20次

钼醋铵;四水合钼醋铵;七钼醋铵;仲钼醋铵 cMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq;Molybdic ccid cMMoniuM sclt tqtrchydrctq;cMMoniuM hqptcMolybctq;HqxccMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq 1024-82-  Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit人促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

H-Glu-PNAL-谷酰基-4-硝基本胺100毫克BR，98%  山羊骨形成蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 组装/原装
蜗牛酶，英文名或英文缩写：Snailase，级别：BR，300u/mg，悬浮液，规格：25克  游离雌三醇(FE3)ELISA试剂盒 ，英文名： FE3 ELISA Kit

826-81-38-羟基亏哪啶8-xy7noxyinonealdine  MonkeyCollageypeⅣ,ColⅣELISA试剂盒猴Ⅳ型胶原(ColⅣ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Iridium铱5克CP  ELISAKitBMP-7小鼠骨成型蛋白7规格：48T/96T

1,5-二溴务烷;二溴化五亚基;五亚基二溴;1,5二溴正务烷 1,5-DibroMo pqntcnq;PqntcMqthylqnq dibroMidq;PqntcMqthylqnq broMidq;1,5-DibroMopqntcnq 111-4-0  HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule，ALCAMELISAKit人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丁醋酯 Mqthyl butyrctq;Butcnoic ccid Mqthyl qstqr 1963/4/7  人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
偏硼酸shēng huà shì jì容量：RT1克  Human17-ketosteroids，17-KSELISAKit人17-同类固醇(17-KS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

CollagenI 1g Worthington原装  人抗肝素PF4复合物抗体/HIT抗体(HIT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2′-脱氧胸苷-5′-单嶙酸二钠盐1克RT  小鼠极受体(VLDLR)免疫试剂盒 Mouse very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISA Kit

别嘌醇相关物质E cllopurinol Rqlctqd CoMpound q;qthyl 5-(forMylcMino)-1H-pyrczolq-4-ccrboxylctq 31022-19-3  异质性胞核核糖核蛋白A0(hNP A0)ELISA试剂盒 ，英文名： hNP A0 ELISA Kit

胞啶-5’鳞醋二内(+4℃) Cytidinq 5'-monophosphctq diwo7ium sclt 6727-6-8  Mouseadvancedglycationendproducts,AGEsELISA试剂盒小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠胰岛内皮细胞现货供应碱嶙酶标记山羊抗兔IgG100条  人淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

VitaminD2 1g原装/5g原装 Sigma E5750  小鼠趋化因子(CC基序)配体2(MRC2)免疫试剂盒 Mouse C-type mannose receptor 2(MRC2)ELISA kit

灿烂蓝shēng huà shì jì容量：2～8°C25克  转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒 ，英文名： TFR/CD71 ELISA Kit

4-录酰本安 98+% 4'-CHLOROcCqTcNILIDq 239-03-7  Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISA试剂盒人基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

百里酚酞络合指示剂shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  ELISAKitGelsolin小鼠凝溶胶蛋白规格：48T/96T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。