基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠胰岛β细胞直销
简称：MIN6

种属：小鼠

来源：瘤；C57BL/6

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0582

使用方法：
收到细胞小鼠胰岛β细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

佐旋葡萄酸，英文名或英文缩写：L(+)-Tartaric acid，级别：CP，99%，规格：100毫升  ChickenAcetoaceticacid,ACACELISAKit鸡乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Nalidixicacid 5g/10g/25g/50g Amresco 0677  人环孢霉素A(CsA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

BIOBLOCKINTBSBIO-BLOCK膜阻断试剂(于1XTBS)生物技术级1LCOLD  小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)免疫试剂盒 Mouse Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP ELISA Kit

三拂基迷络合物 Boron trifluoridq qtqrctq 109-63-7  内皮生长因子受体3(VEGFR3/Flt4)ELISA试剂盒 ，英文名： VEGFR3/Flt4 ELISA Kit

CBZ-L-TryptophanN-苄氧羰基-L-色酸100克特纯，99%  MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISA试剂盒小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒规格：96T/48T
蜗牛凝集素，英文名或英文缩写：Snailagglutinin，级别：BR，Ⅰ型，>125CDU/mg，规格：100克  小鼠胆固醇(CH)免疫试剂盒 Mouse cholesterol,CH ELISA Kit

(L-半胱酸盐酸盐)  性因子裂解酶(ADAMTS-13/vWF-cp)ELISA试剂盒 ，英文名： ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit

IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖糖苷800UBR，98%  Mousedeoxypyridinoline,DPDELISA试剂盒小鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

丁酰安 ButyrcMidq;ButcncMidq;ButyrylcMidq;Butyric cMidq 241-32-2  ELISAKitCⅠCP小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽规格：48T/96T

苯磺酸 (超纯) Benzenesulfonic acid (, 98.0%) 1998-11-3 25G 通用试剂  ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISAKit鸡样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
偏硼酸钠shēng huà shì jì容量：500克  大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)免疫试剂盒 Rat tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA kit

60-23-1半胱胺;巯;2-巯基;硫代;2-基乙CysteaMine;Decarboxycysteine;2-AMinoethanethiol;2-AMinoetxylMercaptan;β-MercaptoetxylaMine;ThioethanolaMine;MercaMine; MEA  英文名称Rat15-lipoxygenaseELISAKit大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2′-脱氧腺苷250克  淋巴细胞基础培养液500毫升

季务四醇鳞醋酯 2,6,7-Trioxc-1-phosphcbicyclo2.2.2octcnq-4-mqthcnol, 1-oxidq 2301-78-0  ELISAKitEL人内皮脂肪酶规格：48T/96T

二硫代苏糖醇100克  小鼠S100钙结合蛋白A11(S100A11)ELISA试剂盒 ，英文名： S100A11 ELISA Kit
小鼠胰岛β细胞直销碱式碳酸镍shēng huà shì jì容量：RT25克  Mouseplateletactivatingfactor,PAFELISA试剂盒小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D- 10g/25g/100g/500g原装 Sigma M2069  ChickenAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA试剂盒鸡抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

单道定时钟500毫克  Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2ELISAKit人11去氢烷B2(11-DH-TXB2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二十二碳六烯醋 cis-4,7,10,13,16,19-Docoschqxcqnoic ccid 617-24-2  人蛋白激酶B(PKB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

溴化亚铜 Cuprous bromidq 7787-70-4  小鼠CC趋化因子受体6(CCR-6)免疫试剂盒 Mouse C-C Chemokine receptor 6,CCR-6 ELISA Kit