公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠内皮细胞特价
简称：C166

种属：小鼠

来源：内皮

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE01177
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞小鼠内皮细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
β-Sitosterol  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O    应急反应生长因子-1   英文名称：   Early growth response 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   EGR-1

β-Anhydrouzarigenin  中文名：  分子式：C23H32O3    转录因子E2F1   英文名称：   anscription factor E2F1   规格：   48T/96T   英文缩写：   E2F1

α-Tocopherolquinone  中文名：  分子式：C29H50O3    腺来源的内皮生长因子   英文名称：   endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor   规格：   48T/96T   英文缩写：   EG-VEGF

α-Spinasterone  中文名：  分子式：C29H46O    中性粒细胞蛋白酶抑制剂Elafin   英文名称：   neuophil elastase inhibitor Elafin   规格：   48T/96T   英文缩写：   Elafin

α-Spinasterol glucoside  中文名：α-菠甾醇葡萄糖苷  分子式：C35H58O6    游离脂肪酸（NEFA）检测   Total iron binding (TIBC) detection
组织无机0含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样  4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one  中文名：  分子式：C10H12N2O2  度：98.0%

组织铁测定试剂盒（比色法）  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  中文名：  分子式：C8H8O4  度：%

组织及血液酸性0酸酶（ACP）试剂盒   可见分光光度法   50管/24样  Pazopanib  444731-52-6  中文名：帕唑帕尼  分子式：C21H23N7O2S  度：98.0%   

组织及血液碱性0酸酶（AKP/ALP）试剂盒   可见分光光度法   50管/24样              Pazopanib  444731-52-6  中文名：帕唑帕尼  分子式：C21H23N7O2S 

组织PKG-I激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
2-Acetyl-6-methoxynaphthalene  中文名：6-甲氧基-2-乙酰萘  分子式：C13H12O2  度：99.0%  小鼠α羟基脱氢酶elisa试剂盒   小鼠α羟基脱氢酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠α羟基脱氢酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠α羟基脱氢酶试剂盒、小鼠α羟基脱氢酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Abscisic acid  中文名：脱落酸  分子式：C15H20O4  度：99.0%  小鼠α葡萄糖苷酶elisa试剂盒   小鼠α葡萄糖苷酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠α葡萄糖苷酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠α葡萄糖苷酶试剂盒、小鼠α葡萄糖苷酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

(S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  中文名：(s)-4-(4-氨基苄基)-1,3-噁唑烷-2-酮  分子式：C10H12N2O2  度：98.0%  小鼠α干扰素elisa试剂盒   小鼠α干扰素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠α干扰素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠α干扰素试剂盒、小鼠α干扰素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

2-Amino-3-Formylchromone  中文名：2-氨基-3-甲酰基色原酮  分子式：C10H7NO3  度：98.0%  小鼠β-防御素(β-DF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Acid Black 1  中文名：酸性黑 1  分子式：C22H14N6Na2O9S2  度：99.0%  小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠内皮细胞特价唾液酸（SA）检测   Apoptosis (TdT mediated by in situ end of the double labelling method) detection  Axitinib  319460-85-0  中文名：阿西替尼  分子式：C22H18N4OS 

唾液酸（SA）测试盒（带SA标准）   Saliva acid (SA) test case (with SA standard)  Ampicillin Trihydrate  7177-48-2  中文名：氨苄西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S  度：98.0%  关键词： 

唾液酸（SA）测定试剂盒（带SA标准）（比色法）                    Physaminimin C  1582259-03-7  中文名：  分子式：C28H38O8 

脱脂奶粉   100g  Amoxicillin trihydrate  61336-70-7  中文名：羟氨苄青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S  度：98.0%   

脱氧核糖核酸酶I   100mg  Amoxicillin  26787-78-0  中文名：阿莫西林  分子式：C16H19N3O5S  度：98.0%  关键词：
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。