使用方法：
收到细胞小鼠细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠细胞特价
简称：EMT-6

种属：小鼠

来源：恶性；雌性；BALB/cCRGL

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0938

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Tenacigenin B  中文名：  分子式：C21H32O5    脂多糖   10mg

Temozolomide  中文名：替莫唑胺  分子式：C6H6N6O2    Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5

Telmisartan tert-butyl ester  中文名：  分子式：C37H38N4O2    L-异亮酸   10g

Telmisartan  中文名：替米沙坦  分子式：C33H30N4O2    L-Isoleucine   50g              

Tegafur  中文名：替加氟  分子式：C8H9FN2O3    脂肪酶（LPS）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样
总碱度测定试剂盒   Total alkalinity determination kit  Rebeprazole   中文名：雷贝拉唑钠  分子式：C18H20N3NaO3S  度：98.0%

总基酸（T－AA）检测   Hydroxyproline sample preeatme                 Androstadienedione  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2 

总基酸（T－AA）测试盒   The total amino acid (TAA) test kit  Rengynic acid  中文名：  分子式：C8H14O4  度：98.0%

总合成酶（NOS）测试盒[测总NOS（T－NOS）]  Raltegravir  中文名：雷特格韦  分子式：C20H21FN6O5  度：98.0%

总合成酶（NOS）测试盒[测总NOS（T－NOS）]  Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate  2099-26-5  中文名：雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯  分子式：C23H34O4
Boldenone acetate  中文名：宝丹酮醋酸酯  分子式：C21H28O3  度：98.0%  小鼠FMS样酪酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Trenbolone acetate  中文名：  分子式：C20H24O3  度：98.0%  小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Trenbolone  中文名：群勃龙  分子式：C18H22O2  度：98.0%  小鼠E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Mestanolone  中文名：美雄诺龙  分子式：C20H32O2  度：98.0%  小鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Nandrolone undecylate  中文名：十一酸诺龙  分子式：C29H46O3  度：98.0%  小鼠C型尿肽(CNP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
小鼠细胞特价豚鼠白介素1α(IL1α)ELISA试剂盒 ，英文名： IL1α ELISA Kit  2-Amino-4-chlorobenzothiazole  19952-47-7  中文名：2-氨基-4-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S  度：98.0%  关键词： 

豚鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-18 ELISA Kit  2-Amino-3-hydroxyanthraquinone  中文名：2-氨基-3-羟基蒽醌  分子式：C14H9NO3  度：98.0%

豚鼠白介素17(IL-17)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-17 ELISA Kit  2-Amino-3-Formylchromone  61424-76-8  中文名：2-氨基-3-甲酰基色原酮  分子式：C10H7NO3  度：98.0%  关键词： 

豚鼠白介素15(IL15)ELISA试剂盒 ，英文名： IL15 ELISA Kit  2-Amino-3,5-dibromobenzaldehyde  中文名：  分子式：C7H5Br2NO  度：98.0%

豚鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit  2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide  19284-81-2  中文名：2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚  分子式：C12H10N2O2S  度：98.0%

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。