使用方法：
收到细胞小鼠逆转录病毒包装细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠逆转录病毒包装细胞现货供应
简称：PT67

种属：小鼠

来源：逆转录病毒包装细胞；雄性；NIH Swiss

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0724

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Stauntosaponin A  1417887-91-2  中文名：  分子式：C28H38O7  度：97.0%  关键词：    小鼠(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Stanozolol  10418-03-8  中文名：康力龙  分子式：C21H32N2O  度：98.0%  关键词：    小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Stanolone  521-18-6  中文名：雄诺龙  分子式：C19H30O2  度：98.0%  关键词：    小鼠补体蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Sprengerinin C  88861-91-0  中文名：  分子式：C44H70O16  度：98.0%  关键词：  ; 麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠叠氮胸苷(AZT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Sprengerinin A  88866-99-3  中文名：  分子式：C38H60O12  度：%  关键词：  麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠氧化型谷胱甘肽elisa试剂盒   小鼠氧化型谷胱甘肽试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠氧化型谷胱甘肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠氧化型谷胱甘肽试剂盒、小鼠氧化型谷胱甘肽elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Cholesterol  57-88-5  中文名：胆固醇  分子式：C27H46O 

小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Levodopa  中文名：左旋多巴  分子式：C9H11NO4  度：98.0%

小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Levamisole   中文名：盐酸左旋咪唑  分子式：C11H13ClN2S  度：98.0%

小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa试剂盒   小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒、小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Lincomycin  中文名：林可霉素  分子式：C18H34N2O6S 

小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Levamisole   中文名：盐酸左旋咪唑  分子式：C11H13ClN2S
Eplerenone  107724-20-9  中文名：依普利酮  分子式：C24H30O6    人主要组织相容性复合体Ⅰ类elisa试剂盒   人主要组织相容性复合体Ⅰ类试剂盒   规格型号：96T/48T   人主要组织相容性复合体Ⅰ类试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人主要组织相容性复合体Ⅰ类试剂盒、人主要组织相容性复合体Ⅰ类 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Flumethasone  2135-17-3  中文名：氟米松  分子式：C22H28F2O5    人轴突生长诱向因子4elisa试剂盒   人轴突生长诱向因子4试剂盒   规格型号：96T/48T   人轴突生长诱向因子4试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人轴突生长诱向因子4试剂盒、人轴突生长诱向因子4 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid  103335-55-3  中文名：  分子式：C19H29NO3    人轴突生长诱向因子1elisa试剂盒   人轴突生长诱向因子1试剂盒   规格型号：96T/48T   人轴突生长诱向因子1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人轴突生长诱向因子1试剂盒、人轴突生长诱向因子1 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile  143612-79-7  中文名：  分子式：C13H13ClN2    人周期素依赖性激酶9(CDK-9)酶联吸附测定试剂盒   Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit

5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  183288-46-2  中文名：  分子式：C13H15N3O2    人周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶联吸附测定试剂盒   Human CDKN2A (Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit
小鼠逆转录病毒包装细胞现货供应瓜酸   ELISA.   96T/48T              Emodin  518-82-1  中文名：大黄素  分子式：C15H10O5 

固（ALD）   96T/48T  Ornidazole  中文名：奥硝唑  分子式：C7H10ClN3O3 

固   英文名称：   Aldosterone   规格：   48T/96T   英文缩写：   Aldosterone  4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one  446292-10-0  中文名：  分子式：C14H17N3O4 

骨桥素/骨桥蛋白   英文名称：   Osteopoin   规格：   48T/96T   英文缩写：   OPN  Methyl β-D-fructofuranoside  13403-14-0  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6 

骨桥蛋白 ( Osteopoin)   作用：   ELISA   规格：   96T   德国 IBL  3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  219921-94-5  中文名：  分子式：C23H37N3O5

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。