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NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒紫外分光光度法
  • 品牌:帛科
  • 产地:国产
  • 型号:50管/48样
  • 货号:BK-S01328
  • 发布日期: 2020-10-27
  • 更新日期: 2025-04-18
产品详请
产地 国产
品牌 帛科
货号 BK-S01328
用途 产品仅用于科研
英文名称
包装规格 50管/48样
纯度 %
CAS编号
别名 NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒
分子式
是否进口

基本信息:

产品名称

检测方法

规格

货号

NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒紫外分光光度法

紫外分光光度法

50/48

BK-S01328

商品介绍:

测定意义
MDH EC1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDHTCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDHNADP-依赖的MDH,细菌中通常只含有NAD-MDH,在真核细胞中,NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。

测定原理:

NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。

特点:
(1)应用广泛 产品仅用于科研
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速

实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以 更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
β-N-乙酰基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒(比色法)  3-Allylrhodanine  1457-47-2  中文名:3-烯丙基罗丹宁  分子式:C6H7NOS2 

β-(D3-H)测定试剂盒(酶比色法)  4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  2549-87-3  中文名:4-丙烯氧基-2-羟基二苯甲酮  分子式:C16H14O3 

α-银环蛇(α-BGT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Triptoquinone A  中文名:  分子式:C20H24O4 

α-岩藻糖苷酶(AFU)测定试剂盒(速率法)                    Xanthopurpurin  518-83-2  中文名:1,3-二羟基蒽醌  分子式:C14H8O4 

α戊二酸脱氢酶(α-KGDH)试剂盒   紫外分光光度法   50管/48样              Atrazine  中文名:阿特拉津  分子式:C8H14ClN5
生长激素   英文名称:   growth hormone   规格:   48T/96T   英文缩写:   HGH  Przewaquinone A  76843-23-7  中文名:紫丹参甲素  分子式:C19H18O4  度:98.0%  关键词:  ; 鼠尾草属; 二萜醌; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

生长分化因子-3   英文名称:   growth differeiation factor 3   规格:   48T/96T   英文缩写:   GDF-3  3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone  899822-97-0  中文名:  分子式:C17H25NO3  度:98.0%  关键词: 

生长分化因子 -3(GDF-3)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装     Nitrendipine  39562-70-4  中文名:尼群地平  分子式:C18H20N2O6 

生长分化因子 -15(GDF-15)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装     3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone  中文名:  分子式:C17H25NO3 

生化检测试剂盒  3-Methylamino-1-(2-thienyl)-1-propanol  116539-55-0  中文名:  分子式:C8H13NOS  度:98.0%
4-Hydroxythiobenzamide  25984-63-8  中文名:  分子式:    Human mannose (Mannose) ELISA Kit 人甘露糖(Mannose)ELISA试剂盒

Clemastine fumarate  14976-57-9  中文名:富马酸氯马斯汀  分子式:C25H30ClNO5    rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

3-Aminopiperidine di  334618-23-4  中文名:  分子式:C5H14Cl2N2    CLIAKitforATMA/TMAB(HumanAi-ThyroidMicrosomeAibody)ELISAKIT人抗甲状腺微粒体抗体规格:48T/96T

Sitagliptin phosphate  654671-78-0  中文名:无水磷酸西他列汀  分子式:C16H18F6N5O5P    线粒体复合物II蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次

4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde  151103-08-1  中文名:  分子式:C8H6F2O3    Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISAKit兔抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒紫外分光光度法D-Tryptophan methyl ester   14907-27-8  中文名:  分子式:C12H15ClN2O2    rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 兔子抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

7-Methoxy-1-naphthaleneacetic acid  6836-22-2  中文名:  分子式:C13H12O3    CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(MouseBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M规格:48T/96T

Dehydrotolvaptan  137973-76-3  中文名:  分子式:C26H23ClN2O3    细菌异化型盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次

Tolvaptan  150683-30-0  中文名:托伐普坦  分子式:C26H25ClN2O3    rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)ELISA试剂盒规格:96T/48T

Abiraterone acetate  154229-18-2  中文名:乙酸阿比特龙酯  分子式:C26H33NO2    豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒 ,英文名: IL12B ELISA Kit
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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