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蛙属虹彩病毒(RIV)PCR检测方法(荧光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-P63978
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-10-12
  • 更新日期: 2025-01-17
产品详请
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BK-P63978
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 详见说明书%
CAS编号
是否进口

实验注意事项:
1
RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2
)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3
)客户尽量不要提供DNARNA样品。
4
)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

产品名称

规格

货号

蛙属虹彩病毒(RIV)PCR检测方法(荧光-PCR)

50T

BK-P63978

实验方法步骤:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
两相分离 每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530℃孵育23分钟。4℃12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
③RNA
沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530℃孵育10分钟后,于4℃12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃7000rpm离心5分钟。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
使用方法:
一、样品采集:
1
、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2
、血液样品:用无菌注射器抽取受检者血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3
、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4
、病灶部位样品:取部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)
1.
注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2.
标记 6 个离心管,分别为 765432
3.
用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.
7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5.
换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6.
换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.
重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实时荧光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNARNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNARNA*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠性激素结合球蛋白(mouse SHBG)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  Methenolone acetate  中文名:美替诺龙醋酸酯  分子式:C22H32O3  度:98.0%

小鼠信号转导分子7(Smad7)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Methoxydienone  2322-77-2  中文名:沃氏物  分子式:C20H28O2 

小鼠新生甲状腺素elisa试剂盒   小鼠新生甲状腺素试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠新生甲状腺素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠新生甲状腺素试剂盒、小鼠新生甲状腺素elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  Methasterone  中文名:甲基屈他雄酮  分子式:C21H34O2  度:98.0%

小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Metamizole   中文名:安乃近  分子式:C13H16N3NaO4S  度:98.0%

小鼠心肽elisa试剂盒   小鼠心肽试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠心肽试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠心肽试剂盒、小鼠心肽eisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。     Betamethasone  中文名:倍他米松  分子式:C22H29FO5
NK-92细胞,恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞 细胞系,Hep-3B细胞 CL-0184PANC-1(*癌细胞)5×106cells/瓶×2二硫代乙酰胺(>98%,BR)Dithiooxamide质量规格:>98%,BR

中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24脱氧核糖核酸酶 IIDNase II, from Pocine Pancreas质量规格:分子生物学级

SLAMF1 Others Human  CD150 细胞裂解液 (阳性对照) 5-硝基吲哚(>98.0%(GC))5-Nitroindole质量规格:>98.0%(GC)

平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)铝酞菁(>98.0%(T))Phthalocyanine Chloroaluminum质量规格:>98.0%(T)

HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 细胞裂解液 (阳性对照) 酞菁铁(II)(升华提)(>98.0%(T))Iron(II) Phthalocyanine (purified by sublimation)质量规格:>98.0%(T)
Y2细胞,小鼠成纤维细胞 顺铂耐药株,COC1/CDDP细胞 食道上皮细胞裂解物HEEpiCL十五氟辛酸(5mmol)[离子对色谱级]IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)质量规格:用于液相色谱-质谱的离子对试剂

非洲绿猴肾细胞;CV-1十五氟辛酸,高等级[离子对色谱级]IPC-PFFA-8 HG质量规格:用于液相色谱-质谱的离子对试剂

IGFBP3 Others Human  IGFBP3 / IBP3 细胞裂解液 (阳性对照) 9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸钠盐[离子对色谱级]IPA-DAS质量规格:用于氨类的荧光离子对试剂

兔角膜前基质层成纤维细胞;RCFBF敌草隆(标准品)Diuron质量规格:分析标准品,99.5%

MAPK1 Others Mouse 小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 茜素红Alizarin red质量规格:AR
α-Spinasterol  481-18-5  中文名:α-菠甾醇  分子式:C29H48O  度:97.0%  关键词:  ; 栝楼; 豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠抗线粒体抗体(mouse AMA)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装

α-Lipoic acid  1077-28-7  中文名:α-硫辛酸  分子式:C8H14O2S2  度:98.5%  关键词:  植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠抗核抗体(mouse ANA)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装

α-Lapachone  4707-33-9  中文名:  分子式:C15H14O3  度:98.0%  关键词:  萘醌; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠紧张素II(mouse ANG II)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  

α-D-Glucose  492-62-6  中文名:α-D-葡萄糖  分子式:C6H12O6  度:98.0%  关键词:    小鼠脂肪酸合成酶   英文名称:   Mouse Fatty Acid Syhase   规格:   48T/96T   英文缩写:   FAS

  蛙属虹彩病毒(RIV)PCR检测方法(荧光-PCR法)  中文名:佐匹克隆  分子式:C17H17ClN6O3  度:98.0%  关键词:    小鼠促卵泡生成激素   英文名称:   Mouse Follicle Stimulating Hormone   规格:   48T/96T   英文缩写:   FSH

本产品只适用于科研,

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