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异嗜毒(X-MuLV)PCR检测(荧光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-P63947
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-10-10
  • 更新日期: 2024-09-20
产品详请
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BK-P63947
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

产品名称

规格

货号

异嗜毒(X-MuLVPCR检测(荧光-PCR法)

50T

BK-P63947

实验方法步骤:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
两相分离 每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530℃孵育23分钟。4℃12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
③RNA
沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530℃孵育10分钟后,于4℃12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃7000rpm离心5分钟。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
使用方法:
一、样品采集:
1
、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2
、血液样品:用无菌注射器抽取受检者血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3
、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4
、病灶部位样品:取部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)
1.
注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2.
标记 6 个离心管,分别为 765432
3.
用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.
7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5.
换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6.
换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.
重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Cholesterol  57-88-5  中文名:胆固醇  分子式:C27H46O 

小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Levodopa  中文名:左旋多巴  分子式:C9H11NO4  度:98.0%

小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Levamisole   中文名:盐酸左旋咪唑  分子式:C11H13ClN2S  度:98.0%

小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa试剂盒   小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒、小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  Lincomycin  中文名:林可霉素  分子式:C18H34N2O6S 

小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Levamisole   中文名:盐酸左旋咪唑  分子式:C11H13ClN2S
PPT1 Others Human  PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸川芎嗪质量规格:>98%,BRLigustrazine HCl

葡萄膜色素细胞;UM头孢氨苄质量规格:>98%,BR,一水合物Cephalexin

犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild Mo-MuLv感染的3T3细胞,Mo-MuLv/3T3细胞 LA795细胞,小鼠系肉豆蔻(标准品)质量规格:HPLC95%,标准品Myristicin

;MRC-5卡枯醇质量规格:HPLC98%,标准品Kakuol

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) L-细辛脂素(标准品)质量规格:HPLC98%,标准品L-Asarinin
TNFRSF17 Others Rat 大鼠 TNFRSF17 / BCMA 细胞裂解液 (阳性对照) 二甲基亚砜(ACS,光谱级)Dimethyl sulfoxide质量规格:ACS,光谱级

大鼠肠上皮细胞完全培养基 100mL乙二醇(光谱 ,99%)Ethylene glycol质量规格:光谱 ,99%

V79仓鼠肺细胞 V79 hamster lung cells RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS甘油(for spectroscopy,99.5%)Glycerol in water for HPLC verification质量规格:for spectroscopy,99.5%

FGF18 Protein Mouse 重组小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 标签)碳酸锂(SP)Lithium carbonate质量规格:SP

Calu-6(肺退行性癌细胞) 5×106cells/瓶×2 微内皮细胞HPrMEC新亚铜试剂盐酸盐一水合物(99%)Neocuproine  monohydrate质量规格:0.99
Stauntosaponin A  1417887-91-2  中文名:  分子式:C28H38O7  度:97.0%  关键词:    小鼠(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Stanozolol  10418-03-8  中文名:康力龙  分子式:C21H32N2O  度:98.0%  关键词:    小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Stanolone  521-18-6  中文名:雄诺龙  分子式:C19H30O2  度:98.0%  关键词:    小鼠补体蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Sprengerinin C  88861-91-0  中文名:  分子式:C44H70O16  度:98.0%  关键词:  ; 麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠叠氮胸苷(AZT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Sprengerinin A  88866-99-3  中文名:  分子式:C38H60O12  度:关键词:  麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠氧化型谷胱甘肽elisa试剂盒   小鼠氧化型谷胱甘肽试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠氧化型谷胱甘肽试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠氧化型谷胱甘肽试剂盒、小鼠氧化型谷胱甘肽elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。

实验注意事项:
1
RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2
)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3
)客户尽量不要提供DNARNA样品。
4
)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
异嗜毒(X-MuLV)PCR检测(荧光-PCR法)实时荧光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNARNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNARNA*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

联系方式
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