产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：副溶血性弧菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Vibrio parahemolyticus
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
副溶血性弧菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
MSC, 小鼠雪旺细胞6-氮杂尿嘧啶shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

人类成纤维细胞系;CNLMG-B5537SKIN 人肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL茜素 Alizarin,97% 72-48-0 5G 通用试剂

人上皮细胞RNAHMEpiC miRNA5 μg二言醋组安 Histcminq dixy7nochloridq 1926/9/8

PCNA Others Human 人 PCNA 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) LOADINGDYEBASE,25X25X 蛋白电泳上样染料超级暗紫色微粘稠液体RTsigma

非洲绿猴肾细胞;VERO444-94-8儿价级儿流(剧毒)7m7w
SK-OV-3[SKOV-3]细胞，人细胞 人上皮细胞,HBE细胞 脑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)CLA (>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)CLA

兔角膜前基质层成纤维细胞;RCFBFMCLA (>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)MCLA

TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人细胞裂解液 (阳性对照) FCLA 自由酸[化学发光试剂]质量规格：化学发光试剂FCLA Free Acid

CL-0143Lncap clone FGC(人细胞)5×106cells/瓶×2红-CLA(含氮量：9.00-10.30 %)质量规格：含氮量：9.00-10.30 %Red-CLA

CTSZ Others Human 人 CTSZ 人细胞裂解液 (阳性对照) 13X分子筛(60-80目,气相、液相色谱柱专用)质量规格：60-80目,气相、液相色谱柱专用Molecular sieves Type 13X
CLDN11 Others Human 人 CLDN11 / Claudin-11 人细胞裂解液 (阳性对照) L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非动物源500 gm60-18-4RT

骨髓间质干细胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells牛胆盐 Bilq sclt,froM ox;

HS-6细胞，人色素瘤细胞 德氏乳杆菌保加利亚亚种 人神经母细胞瘤细胞;SH-SY5Y,CRYSTALLINE(环已亚胺)超级1GCOLD

WERI-Rb-1(人视网膜神经细胞) 5×106cells/瓶×2乙炔-1,2-二羧酸shēng huà shì jì容量：100克

IMR-32(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞细胞 人细胞;LNCaP(蛋白胨)
副溶血性弧菌探针法荧光定量PCR试剂盒MCF-7/Adr 腺癌/阿霉素耐药株2,7-双(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼环-2-基)-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-di-n-octylfluorene质量规格：>98.0%(HPLC)

MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP-8 / CLG1 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯并环丁1(>94.0%(GC))Benzocyclobutene质量规格：>94.0%(GC)

猫肾细胞;CRFK9,9-二甲基-9H-9-硅芴(>98.0%(GC))9,9-Dimethyl-9H-9-silafluorene质量规格：>98.0%(GC)

TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,7-二溴菲-9,10-二酮(>97.0%(GC))2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione质量规格：>97.0%(GC)

95-C 低转移萘-1,4,5,8-四羧酸二酐(>95.0%(HPLC)(T))Naphthalene-1,4,5,8-tetracarboxylic Dianhydride质量规格：>95.0%(HPLC)(T)