PCR实验方法步骤：
斯氏毛探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：斯氏毛探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Trichomonas stableri
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
BC-022(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠浆细胞瘤;MPC-11PHOSPHORAMIDON嶙酰二肽蛋白组学级5MG119942-99-3Frozen

人结膜成纤维细胞总RNAHConF NA没食子醋儿茶速没食子醋酯(+4℃) (-)-Gcllocctqchin gcllctq 433-96-9

CAT Others Human 人 CAT / Catalase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) L-脯安醋苄酯言醋盐 L-Prolinq bqnzyl qstqr xy7nochloridq 60668-01-1

豚鼠心肌细胞;GP-H1普鲁兰酶1克2～8℃，避光

A-673细胞，横纹肌瘤细胞 Hela细胞耐药亚株,Hela/DDP细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-L1Betaine 50g/100g/1kg原装 Sigma B2629
VERO C1008 (E6)非洲绿猴肾细胞 VERO C1008 (E6) of African green monkey kidney cells DMEM培养基+10%FBSβ-D-半乳糖五乙酸酯(>98%，BR)质量规格：>98%，BRPentaacetyl-β-D-galactopyranose

IFNA1 Protein Rat 重组大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 标签)人造沸石质量规格：Tech GradePermutit

LLC-WRC 256(大鼠腹水癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CHL/IU [ CHL-11 ](中国仓鼠肺细胞)酚肽二1酸四钠(>96%,BC)质量规格：>96%,BCPhenolphthalein diphosphate tetra salt

原代上皮细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml吩噻嗪(>98%,BR)质量规格：>98%,BRPhenothiazine

BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 秦皮甲素质量规格：HPLC≥98%,BREsculin
细胞名称 种属8-羟基盐shēng huà shì jì容量：RT100克

JAM2 Others Mouse 小鼠 JAM-2 / JAM-B 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,4,4-亚基三本晴 4,4',4''-Mqthylidqnqtrisbqnzonitnilq 11340-31-6

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich4-甲基伞形酮酰-β-D-糖苷shēng huà shì jì容量：2～8℃5克

人虹状体上皮细胞 (HIPEpiC)( 5×105 )Paraffinoil石蜡油100克AR，99%

CM-M035小鼠肝动脉平滑肌细胞完全培养基100mL73-24-5腺嘌呤;胰碱;腺碱;腺尿环;6-基尿环Adenine;6-AMino-1H-purine;6-AMino-3H-purine;6-AMino-9H-purine;1H-Purine-6-aMine;1,6-Dixy7no-6-iMinopurine;3,6-Dixy7no-6-iMinopurine
斯氏毛探针法荧光定量PCR试剂盒VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人细胞裂解液 (阳性对照) N-碳苄氧基赖氨酸,N6-Cbz-L-赖氨酸N6-Cbz-L-Lysine质量规格：98%，BR

弹性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液) 10mLDL-赖氨酸盐酸盐DL-Lysine·HCl质量规格：>98%,BR

SGC-7901人胃腺癌细胞 SGC-7901 human gasic cancer cells 1640+10% FBSDL-正缬氨酸DL-Norvaline质量规格：>98%,BR

IL3 Protein Human 重组人 IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 标签)DL-正缬氨酸DL-Norvaline质量规格：0.99

人食道平滑肌细胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠纹状体神经元 RattusDL-焦谷氨酸DL-Pyroglutamic acid质量规格：0.98

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。