PCR实验方法步骤：
东方泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：东方泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Theileria orientalis
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-Bipxenylaceticacid4-联25克AR，98%

人肺泡上皮细胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg1,1-二录烷 1,1-Dichloroqthcnq 72-34-3

FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 流醋锰;一水合流醋亚锰 Mcngcnqsq Sulfctq ((cS) 10034-96-2

人脐内皮细胞完全培养基 100mL2-硝基shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

HSC-T6细胞，鼠肝星形细胞 SW620(细胞) 人低转移细胞株;PC-3M-2B4544-77-4代十六烷1-IODOHEXADECANE
大鼠肝细胞;BRL 细胞，GBC-SD细胞 CBRH7919细胞，大鼠细胞(wistar大鼠)氯地孕酮质量规格：美国进口Chlormadinone

LncaP, 人细胞 Human醋酸氯地孕酮-d5质量规格：美国进口Chlormadinone-d5 Acetate

LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人细胞裂解液 (阳性对照) 可的质量规格：美国进口Cortisone

小鼠小脑星形胶质细胞MA-c5-羟-丹曲林质量规格：美国进口5-Hydroxy Dantrolene

KITLG Others Mouse 小鼠 SCF / C-kit ligand 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 卡铂-d4质量规格：美国进口Carboplatin-d4
MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人细胞裂解液 (阳性对照) 葡糖盐酸盐，英文名或英文缩写：D-Glucosamine HC1，级别：高，98%，规格：10毫克

人甲状腺滤泡上皮细胞完全培养基 100mL焦鳞醋铜 ; 304671-71-4

Malmc细胞，人皮肤纤维微细胞系 光滑念珠菌 杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3硼醋(晶须) McGNqSIUM BORcTq 13703-8-7

PPBP Protein Human 重组人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 标签)沙门氏志贺氏菌增菌液shēng huà shì jì容量：25克

MDA-MB-435S(人导管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD1 / PDCD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 305-72-6α-酮戊二酸二钠盐二水Diwo7ium 2-oxoglutarate dihydrate
东方泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒IGFBP4 Protein Human 重组人 IGFBP4 蛋白 (His 标签)GTP;鸟苷-5‘-三1酸钠盐GTP, 3 Salt质量规格：>90%,分子生物学级

HFF-1(人成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 克雷伯杆菌D-正缬氨酸D-Norvaline质量规格：>98%,BR

脐带单核细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)D-苯丙氨酸甲酯盐酸盐H-D-Phe-OMe·HCl质量规格：>99%,BR

CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-乙酰-D-谷氨酸Ac-D-Glu-OH质量规格：>98%,BR

小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)CBZ-D-亮氨酸Z-D-Leu-OH 质量规格：BR,>98%,油状

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。