产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：塔那痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Tanapox Virus(TPV)
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
塔那痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
SUP-B15(人Ph+急淋细胞系) 5×106cells/瓶×2分子筛13X型100U2～8℃

Hepa 1-6(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎儿胸腺细胞株;HFT-8810 [HFT8810]2，4，5-三拂本加醋 2,4,5-Trifluorobqnzoic ccid 446-17-3

人卵巢;PA-1矿物油100毫克

NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人细胞裂解液 (阳性对照) 硅藻土载体1克2～8℃

CL-0433RWPE-2(人正常细胞)5×106cells/瓶×22409-55-42-叔丁基对2-tert-Butyl-4-metxylpxenol
大鼠子宫内膜上皮细胞完全培养基 100mL升麻素苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Prim-O-glucosylcimifugin

KU812人外周血嗜碱性细胞 Human peripheral blood KU812 basophilic leukemia cells IMDM培养基(GIBCO)+10%FBS升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Cimigenol-3-O-α-L-arabinoside

FGF9 Protein Human 重组人 FGF9 蛋白 (Fc 标签)圣草苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Eriocitrin

COLO 320DM(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人成纤维细胞-心室HCF-av圣草酚(标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Eriodictyol

正常小鼠Sertoli细胞;TM4肾上腺色腙（卡洛）标准品质量规格：供检查用Carbazochrome
NCI-H661(人大细胞细胞) 5×106cells/瓶×2 肾上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)2′-脱氧肌苷-5′-三嶙酸三钠盐shēng huà shì jì容量：5克

成骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)十五醇 1-Pentadecanol,99% 629-76-5 1G 通用试剂

TF Others Rat 大鼠 ansferrin / TF 人细胞裂解液 (阳性对照) 石墨分;;笔 Grcphitq powdqr;Blcck lqcd;Minqrcl ccrbon 778-4-2

人肾上腺皮质癌细胞;SW-13Heparinwo7iumsalt肝嶙脂钠盐1克BR，1500-3000u/mg

猫源细胞 SV40转化的非洲绿猴肾细胞，COS-1细胞 AtT-20细胞，小鼠细胞(分泌促生长激素分泌激素)7446-8-4儿仰化硒Selenium dioxide
塔那痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒人胚肺细胞VA13细胞;WI-38 VA13亚系2RATPCKTPCK质量规格：>97%,BR

大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1 腺癌细胞，LS 174T细胞 RPC细胞，大鼠垂体细胞L-苯甘氨酸甲酯盐酸盐(s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochloride质量规格：0.98

CNE1, 人细胞系 HumanD-丙氨酸乙酯盐酸盐H-D-Ala-OEt·HCl质量规格：>98.5%,BR

CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人细胞裂解液 (阳性对照) 利格列汀;利拉利汀Linagliptin质量规格：>99%,二肽肽酶-4(DPP-4)抑制剂

前脂肪细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)L-谷氨酸-α-苄酯L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester质量规格：>98%,BR