产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：蛙病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Ranavirus
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
蛙病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
L-6TG细胞，肌母细胞 人细胞,JCA-1细胞 人胚;MRC-5间硝基本胺100u

猕猴皮肤细胞;MMS4啊利新蓝8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1

ECE2 Others Human 人 ECE-2 人细胞裂解液 (阳性对照) γ-环糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3

人肾上皮细胞总RNAHREpiC NA，英文名或英文缩写：potewwium xy7noxide，级别：CP，98%，规格：100克

小鼠少突胶质前体细胞(MOPC)(5×105)N-AcetylneuneminicAcid 25mg/100mg原装 INALCO1758-0100
大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3无水三录化，英文名或英文缩写：Chromium(III) chloride anxy7nous，级别：标准品，99%，规格：5克

LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人细胞裂解液 (阳性对照) 三氧化二钴 COBcLT(III) OXIDq BLcCK 1308-04-9

LA795瘤 肺腺癌IMIDAZOLE咪唑蛋白组学级白色至浅黄色固体RTsigma

SK-OV-3人细胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'5A+10% FBS4,4′-亚甲基二安替比林，英文名或英文缩写：DAM，级别：AR，99%，规格：500克

FLT3LG Protein Mouse 重组小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 标签)Ampholine PH4-6/5-7/6-9/3-9.5 国产
LLC-MK2细胞，恒河猴肾细胞 人转基因细胞,RKO-E6细胞 CM-H117人脑内皮细胞完全培养基100mL山梨酸钾（标准品）Potassium Sorbate质量规格：含量测定

正常大鼠肾细胞;NRK甲磺酸倍他司汀（标准品）Betahistine mesylate质量规格：含量测定

IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人细胞裂解液 (阳性对照) 葡醛内酯（标准品）Glucurolactone质量规格：检查

小鼠小胶质细胞MM反铂transplatin 质量规格：>95%

FAM19A2 Others Human 人 FAM19A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 草酸（标准品）Oxalic acid质量规格：含量测定
蛙病毒探针法荧光定量PCR试剂盒SK-N-SH细胞，人神经上皮瘤细胞 环状芽孢杆菌 人上皮细胞RNAHPEpiC miRNA5 μg氢氧化钙(>95%,BR)Calcium hydroxide质量规格：>95%,BR

SF767(人细胞) 5×106cells/瓶×2N-甲酰伐伦克林N-Formyl Varenicline质量规格：美国进口

HCT-15(人细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BN-葡萄糖苷伐伦克林Varenicline N-Glucoside质量规格：美国进口

人细胞;CNE-2Z伐伦克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide质量规格：美国进口

AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照) 去乙酰基长春瑞滨Deacetyl Vinorelbine质量规格：美国进口