PCR实验方法步骤：
浣熊痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：浣熊痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Raccoonpox virus
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人真皮成纤维细胞-胎儿总RNAHDF-f NA绞股蓝皂苷XLIX(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Gypenoside XLIX

KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人细胞裂解液 (阳性对照) YM-201636质量规格：>98%,PIKfyve抑制剂YM201636

人真皮微内皮细胞完全培养基 100mL金石蚕苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Poliumoside

VERO E6细胞，猴肾细胞系 Lec1(卵巢细胞) 小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]金丝桃苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Hyperoside

EFNA5 Protein Canine 重组狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)6-甲氧基-2-萘乙酮（标准品）质量规格：TLC法检查2-Acetyl-6-methoxynaphthalene
CNDP1 Others Human 人 CNDP1 人细胞裂解液 (阳性对照) CarboxypeptidaseB精蛋白酶100克BR，99%

大鼠骨骼肌成肌细胞;L6二十二烷酸 Behenic acid,99% 112-85-6 1G 通用试剂

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) 苏木色精;苏 HqMctoxylin;(Z)-11-HDOL;xy7noxybrcsilin;Ncturcl blcck-1;C.I.75290 217-8-

T-111A木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)1mLN-Acetyl-L-Glutamine茶酸100微克BR，98%

HB细胞，人细胞 人脐内皮细胞,HUVEC(原代)细胞 大鼠嗜碱性粒细胞性细胞;RBL-11707-03-5二本基1酸Dipxenylphosphinic acid
HEH 人胚胎组织来源细胞群勃龙醋酸酯 Revalor-H Trenbolone acetate质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养

CM-R083大鼠滑膜细胞完全培养基100mL水飞蓟宾(标准品)Silibinin质量规格：HPLC>97%，标准品

NCI-N87 [N87]人细胞水飞蓟宾Silibinin质量规格：>97%,BR

EB病毒转化的人B细胞;KMY0928 人前脂肪细胞完全培养基 100mL依泽替米贝;依折麦布Ezetimibe质量规格：>99%

小鼠星形胶质细胞MA依泽替米贝;依折麦布(标准品)Ezetimibe质量规格：HPLC>99%,标准品
浣熊痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒L W-3A 小鼠皮下结缔组织细胞羟基波生坦Hydroxy Bosentan质量规格：美国进口

CM-H067人肾系膜细胞完全培养基100mLN-去甲基克拉霉素N-Desmethyl Clarithromycin质量规格：美国进口

B16-F10, 小鼠色素瘤高转移细胞阿糖胞苷 5‘-单1酸盐Cytarabine 5'-Monophosphate质量规格：美国进口

人卵巢;PA-1 人视网膜muller细胞完全培养基 100mL达卡巴嗪-d6Dacarbazine-d6质量规格：美国进口

人表皮色素细胞-浅色素cDNAHEM-l cDNA达沙替尼β-D-葡萄糖苷Dasatinib β-D-Glucuronide质量规格：美国进口

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。