产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：派琴虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Perkinsus
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
派琴虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
小鼠成纤维细胞;φ2 小鼠气管上皮细胞完全培养基 100mLN-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺100克

HCT116/L 人耐奥沙利铂耐药株减性蓝6B cLKcLI BLUq 6B 8004-90-8

SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) 青醋;青基醋;青基醋醋 Cycnoccqtic ccid;Mclonic Mononitnilq 1937/9/8

人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0氢氧化铝1克

SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人细胞裂解液 (阳性对照) (IV型胶原酶)
大隐平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)对蓝钠盐，英文名或英文缩写：BCIP， 2Na，级别：AR，60%，规格：25克

人导管癌细胞;ZR-75-1 大鼠平滑肌细胞完全培养基 100mLD(-)乳醋(-20℃) (R)-Lcctctq 1036-41-7

CT-26 WT 小鼠细胞L-状腺速内;L-状腺安内;3,5,3′,5′-四典状腺-L-原安 L-Thyroxinq wo7iumsclt;3,3′,5,5′-Tqtrciodo-L-thyroninq wo7ium sclt pqntchydrctq;wo7ium lqvothyroxinq;Lqvothyroxinq wo7ium;qltroxin;Thyroxqvcn; 2416-62-3

HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 香柠檬油，英文名或英文缩写：Bergamot Oil，级别：AR，99%，规格：10毫克

大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-12083-91-2N，N-二甲基基硅胺N,N-Dimetxyltrimetxylsilylamine
ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人细胞裂解液 (阳性对照) 岩白菜素(标准品)Bergenin质量规格：HPLC≥98%，标准品

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21岩白菜素Bergenin质量规格：>97%,BR

TLR2 Others Human 人 TLR2 / CD282 (aa 1-587) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸巴马汀,盐酸掌叶防己碱(标准品)Palmatine hydrochloride质量规格：HPLC≥98%，标准品

CL-0025AR42J(大鼠胰腺外分泌细胞)5×106cells/瓶×2盐酸巴马汀,盐酸掌叶防己碱Palmatine hydrochloride质量规格：HPLC≥97%,BR

Hepa 1-6, 小鼠细胞 细胞,RCC-krause细胞 SK-HEP-1(细胞)盐酸黄柏碱(标准品)Phellodendrine chloride质量规格：HPLC≥98%，标准品
派琴虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒EPOR Others Human 人 EPOR / Erythropoietin Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 芴(标准品)Fluorene质量规格：分析标准品,≥99.5%(HPLC)

人二倍体细胞;HELβ-胡萝卜素（标准品）β-Carotene质量规格：HPLC≥90%，标准品

大鼠条纹神经元(RNs)(1×106)胡麻属苷（标准品）Sesamoside质量规格：HPLC≥98%，标准品

CM-H015人成纤维细胞完全培养基100mL葫芦巴碱盐酸盐（标准品）Trigonelline Hydrochloride质量规格：HPLC≥98%，标准品

615小鼠T细胞性瘤株;L7712 小鼠肾实质细胞完全培养基 100mL葫芦素B(标准品)Cucurbitacin B质量规格：HPLC≥95%，标准品