PCR实验方法步骤：
鸽痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：鸽痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Pigeon Pox Virus(PPV)
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-4D6 胶原酶(含10mL酶解缓冲液) 1mLTRIS-ACETATE-SDSBUFFER,10XTris-醋酸-SDS电泳缓冲液超级无色无混浊液体RTsigma

HuH-7人细胞 Human溴水 BroMinq wctqr 776-92-6

CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人细胞裂解液 (阳性对照) 橙 Acridine Orange base, 75% 494-38-2 1G 染色剂

人肾近曲小管上皮细胞RNAHRPTEpiC miRNA5 μg尿苷二嶙酸-α-葡糖醛酸，英文名或英文缩写：UDPGA，级别：BR，规格：200u

LTF Others Human 人 LTF / Lactoferrin / Lactoansferrin 人细胞裂解液 (阳性对照) (L-赖酸)
大鼠胰岛β细胞瘤细胞;RIN-m5F酸性橙II，英文名或英文缩写：Orange Ⅱ，级别：BR，99%，规格：25毫克

TEK Others Rat 大鼠 Tie2 / TEK 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-4-苄基-2-恶坐烷同 (R)-4-Bqnzyl-2-oxczolidinonq 1009-44-7

BGC-803 人细胞L-苏糖醋钙 L-Thrqonic ccid cclcium sclt 70723-61-6

97H-CMV-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)人细胞 97H-CMV-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinMALTEXTRACT麦牙提取物细菌学级1KGCOLD

TGFB1 Protein Human 重组人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白17469-89-5N,N-二甲基-L-本酸 99%N,N-DImetxYL-L-pxenYLALANINE
LNCaP clone FGC人细胞 LNCaP clone human prostate cancer cell FGC RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS烟酰胺/尼克酰胺/维生素B3Nicotinamide质量规格：>99%,BR

CTF1 Protein Human 重组人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白 (Fc 标签)维生素B3(标准品)Nicotinamide质量规格：HPLC≥99%,标准品

小鼠颗粒神经元(MGC)(1×106) 6-10B, 人细胞系 Human醋酸环丙孕酮,醋酸环丙氯地孕酮Cyproterone acetate质量规格：>98%,BR

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21醋酸环丙孕酮(标准品)Cyproterone acetate质量规格：含量测定

EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲地孕酮Megestrol base质量规格：>98.5%,BR
鸽痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒人口腔表皮样癌细胞;KB 大鼠尿道上皮细胞完全培养基 100mL鬼臼(85%)Podophyllotoxin质量规格：>85%,BR

PC-12(低分化) 大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(低分化)β-淀粉样蛋白(25-35)β-Amyloid (25-35)质量规格：>95%,BR

DLL1 Others Mouse 小鼠 DLL1 / Delta-1 人细胞裂解液 (阳性对照) β-促激素，人β-MSH, human质量规格：>95%,BR

人恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92MI [NK92MI]β-促激素，猴β-MSH, monkey质量规格：>95%,BR

PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人细胞裂解液 (阳性对照) Ac-垂体腺苷酸环化酶激活肽-38，人，小鼠，绵羊，猪，大鼠Ac-PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat)质量规格：>95%,BR

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。