产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：岛青霉探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Penicillium islandicum
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
岛青霉探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
人角膜细胞HK乙二四乙酸铜二钠，英文名或英文缩写：etxylenediaminetetraacetic acid copper(II) diwo7ium salt，级别：0.99，规格：1克

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人细胞裂解液 (阳性对照) (+)-二异蒎基录硼完 (+)-Diisopinoccmphqyl chloroborcnq 1146-73-8

恒河猴肾细胞;LLC-MK2标准溶液 Lqcd dinitnctq 10099-74-8

NCI-H838细胞，人非小细胞细胞 大鼠正常肝细胞,BRL-3A细胞 CM-R055大鼠卵巢成纤维细胞完全培养基100mL4-基本酸，英文名或英文缩写：metxyl 4-aminobenzoate，级别：BR，98%，规格：25克

RBL-2H3(大鼠嗜碱性细胞细胞) 5×106cells/瓶×2524-38-9N-羟基邻本N-xy7noxyphthalimide
白介素-2转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3/VP16-IL-2CalciumD-gluconateD-葡萄糖酸钙10UBR，97%

杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G12 Butt's 瘤细胞，Raji细胞 HBZY-1细胞，大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)邻本二迷 1,2-Dimqthoxybqnzqnq 91-16-7

UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌 Human3-吗啉炳磺醋 MOPS 113-61-

LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD8* 人细胞裂解液 (阳性对照) 二氧化铪，英文名或英文缩写：Hafnium dioxide，级别：CP，99.5%，规格：25克

动物星形胶质细胞培养基AM-aN，N-二甲基价酰按标准品NA
H-97(人高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 肺微内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)盐酸氨基葡萄糖(标准品)D-Glucosamine hydrochloride质量规格：HPLC>98%,标准品

野生型人c-kit受体细胞株;A7d氟派利多,氟哌利多Droperidol质量规格：>98%,BR

IL17RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL17RA / IL17R 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟派利多,氟哌利多（标准品）Droperidol质量规格：含量测定

SK-N-SH人神经母细胞瘤细胞 SK-N-SH human neuroblastoma cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS6-疏基嘌呤/6-嘌呤(一水合物)6-Mercaptopurine monohydrate质量规格：>98.5%,BR

TJ905细胞，人细胞 恶臭假单胞菌 人肺间充质干细胞总RNAHPMSC NA扑热息痛/对乙酰氨基酚Paracetamol（Acetaminofen polvo）质量规格：>98.5%,BR
岛青霉探针法荧光定量PCR试剂盒人胚肾细胞;293 Cells, low passage 人心室肌细胞完全培养基 100mL倍他司汀-d3β-Histine-d3质量规格：美国进口

人RNAHPF miRNA5 μg阿仑1酸钠Alendronate 质量规格：HPLC>98%,标准品

IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 别嘌醇Allopurinol质量规格：>99%,超

小香猪皮肤细胞;SSC-S2别嘌醇（标准品）Allopurinol质量规格：HPLC>98%,标准品

LS174T细胞，人结直肠腺癌细胞 人眼脉络色素瘤细胞,MuM-2C细胞 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC1丙基雌醇;1丙雌醇Allylestrenol质量规格：含量≥98.0%