PCR实验方法步骤：
幼虫芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：幼虫芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Paenibacillus larvae
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
CNE1, 人细胞系 草鱼吻端细胞,ZC-7901细胞 SW480 [SW-480](人细胞)丁酰shēng huà shì jì容量：25克

小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)三氧化;腊酐;氧化;醋;无水醋;酐;绿 ChroMic cnhydridq;ChroMic ccid;ChroMiuM(VI)oxidq;cncdonis grqqn;ChroMic oxidq;ChroMq grqqn;ChroMiuM sqsquioxidq 1333-8-0

EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) 石蜡油 (USP级) Mineral oil (meets USP testing specifi... 8042-47-5 100ML 通用试剂

人癌细胞;MDA-MB-157俾氏麦棕Yshēng huà shì jì容量：保存：-20℃250毫克

PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人细胞裂解液 (阳性对照) DMSO 100ml/500ml Amresco分装
非洲绿猴肾细胞;GL-371,2-二羟基醌，英文名或英文缩写：Alizarin，级别：超，规格：1克

FLT1 Others Rat 大鼠 VEGFR1 / FLT-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢哌同二水合物 Cqfopqrczonq Dihydrctq 6893-19-0

胎盘羊膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)dGTP,100mMSOLUTION,pH7.0 dGTP 100 mM溶液, pH 7.0生物技术级透明无色液体FROZENsigma

Jurkat D,E细胞，人T瘤转基因细胞 615小鼠株,Ca759细胞 多聚赖氨酸10 mg/mlPLL水解乳清蛋白25克

NCI-H295R(人肾上腺皮质腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2胆硫乳琼脂(D.H.L)DHL AGAR SAKAZAKI
NCI-N87 [N87]人细胞 细胞，Ec109细胞 MG-63(细胞)盐酸多奈哌齐-13C3Donepezil-13C3 Hydrochloride质量规格：美国进口

人细胞;NCI-H16505-O-去甲多奈哌齐5-O-Desmethyl Donepezil质量规格：美国进口

APOH Others Human 人 APOH / B2G1 人细胞裂解液 (阳性对照) 二氢多奈哌齐（非对映）Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)质量规格：美国进口

鼬肺上皮细胞;MV-1-LuDehydrodeoxy多奈哌齐（多奈哌齐杂质）Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)质量规格：美国进口

CD63 Others Rat 大鼠 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照) 脱氧盐酸多奈哌齐Deoxy Donepezil Hydrochloride质量规格：美国进口
幼虫芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒MDA-MB-157细胞，癌细胞 人胎盘绒膜癌细胞,BeWo细胞 人肺动脉内皮细胞RNAHPASMC miRNA5 μg杆菌肽锌Bacitracin Zinc 质量规格：≥60U/mg,USP,BR，可用于细胞培养

恒河猴肾细胞;MMK2阿西美辛(标准品)Acemetacin质量规格：HPLC>98%,标准品

EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人细胞裂解液 (阳性对照) 丙嗪Chlorpromazine HCl质量规格：>98%

人肺间充质干细胞总RNAHPMSC NA丙嗪(标准品)Chlorpromazine HCl质量规格：含量测定

小鼠海马趾神经细胞(MH-h)(1×106)地红霉素Dirithromycin质量规格：>95%,BR

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。