PCR实验方法步骤：
细小病毒19探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：细小病毒19探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Parvovirus B19(PVB19)B19
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
Ha Fe细胞，羊膜细胞 人高分化腺癌细胞系,THC-8307细胞 CM-R045大鼠小肠粘膜上皮细胞完全培养基100mL乙二安四乙酸三钾盐5毫克

大鼠肝细胞;BRL 3AD-谷酸 D-Glutamic acid,≥99% 6893-26-1 5G 通用试剂

MICB Others Human 人 MICB 人细胞裂解液 (阳性对照) 区醋 Kojic ccid 201-30-4

人绒毛膜间充质基质细胞HCMSC1，3-500克

FLRT2 Others Human 人 FLRT2 人细胞裂解液 (阳性对照) 本甲酰录(*)Benzoyl chloride
非洲绿猴肾细胞;BS-C-1锡粒25克

RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人细胞裂解液 (阳性对照) L-赖酸醋酸 L-Lysine acetate salt (HPLC,≥98%) 57282-49-2 5G 通用试剂

人气管上皮细胞完全培养基 100mL厄贝沙坦 Irbqscrtcn 13840-11-6

UM细胞，人葡萄膜色素细胞 土曲霉 人细胞;MKN-45三本基氧化膦1克RT

ANGPTL4 Protein Human 重组人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 标签)100587-90-4醋酸镧LANTHANUM ACETATE HYDRATE
Lec1仓鼠卵巢细胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培养基(GIBCO)+10%FBS盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼Procarbazine HCl质量规格：>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养

IGFBP5 Protein Canine 重组狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 标签)盐酸丙卡巴肼(标准品)Procarbazine HCl质量规格：HPLC>98%,标准品

EB (NBL-4) (牛胚气管细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂体细胞RPC盐酸丙卡特罗Procaterol HCl质量规格：>98.5%,CP2005,半水合物

胰腺导管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)丙泊酚Propofol质量规格：>98.0%,熔点18

FCGR3A Others Rat 大鼠 CD16a / FCGR3A 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸雷洛昔芬Raloxifene HCl质量规格：>98.5%,BR
细小病毒19探针法荧光定量PCR试剂盒PA317细胞，小鼠胚成纤维包装细胞 6T-CEM(T细胞) 大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-12-羟基阿托伐他汀内酯-d52-Hydroxy Atorvastatin Lactone-d5质量规格：美国进口

EFNB1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 标签)阿替洛尔（标准品）Atenolol质量规格：含量测定,HPLC>99%,标准品

A-427(人细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T细胞;Cl.Ly1+2-/9阿托伐他汀钙Atorvastatin calcium质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养

人肺动脉内皮细胞总RNAHPAEC NA阿托伐他汀钙(标准品)Atorvastatin calcium质量规格：HPLC>98%,标准品

小鼠周神经成纤维细胞(MPNF)(5×105)阿扎胞苷/5-氮杂胞嘧啶核苷(进分)Azacitidine (5-Azacytidine)质量规格：> 98%,进分,Sigma A2385

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。