PCR实验方法步骤：
新德里超级细菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：新德里超级细菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：New Delhi Metallo-beta-Lactamase-1 Bacteria (NDM-1，Superbug)
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SW1990细胞，人细胞 人胸膜瘤细胞,SMC-1细胞 杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E74-乙酰氧基它莫西芬质量规格：美国进口4-Acetoxy Tamoxifen

HUVEC(HUV-EC-C) (人脐内皮细胞) 5×106cells/瓶×2N-去甲基-4-羟基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)质量规格：美国进口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture)

Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 内皮细胞生长培养基MV2(即用型) 500ml(Z)-4-羟基-N-去甲基它莫西芬 (同分)质量规格：美国进口(Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers)

人基质细胞裂解物HHGMCLN-去甲基-4-羟基它莫西芬 (大约1:1 E/Z 混合物)质量规格：美国进口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 1:1 E/Z Mixture)

IL17RB Others Human 人 IL17RB / IL-17 Receptor B 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (1R,4R)-N-去甲基盐酸舍曲林质量规格：美国进口(1R,4R)-N-Desmethyl Sertraline Hydrochloride
Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)DEAE葡聚糖凝胶A-50shēng huà shì jì容量：5KU

MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 亚油酸 Methyl linoleate,≥99% 112-63-0 1G 通用试剂

人成细胞;MG-63肝速酶I(-20°C) HqPcRINcSq 902-39-

豚鼠心肌细胞;GP-H1 EBV 转化的绒猴白细胞，B95-8细胞 MEL细胞，小鼠红细胞PONCEAUS丽春红S (猩红S)*深红色结晶粉末RTsigma

人胚;MRC-5587-84-8二本胺化 98%DIpxenYLAMINE SULFATE
CM-H010人小气道上皮细胞完全培养基100mL盐酸普鲁卡因(标准品)Procaine hydrochloride质量规格：HPLC>99%,标准品

WM35, 人色素瘤细胞伏立诺他杂质Vorinostat impurity质量规格：>98%

人细胞;Hep G2 [HepG2] 大鼠完全培养基 100mL当药醇苷(标准品)Swertianolin质量规格：HPLC≥98%,标准品

原代神经元细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml皂素(进分)saponin质量规格：进分，≥10 %

MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 苦豆碱Aloperine质量规格：HPLC>95%,BR
新德里超级细菌探针法荧光定量PCR试剂盒LOVE1细胞，结细胞 人色素瘤细胞,B16细胞 EB病毒转化的人B细胞;HH-29巴马汀氯化物一水合物(分析标准品)Palmatine chloride hydrate质量规格：分析标准品

HCC827(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2BSA[=N,O-双(*基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC))N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide质量规格：>75.0%(GC)

ARSA Others Human 人 ARSA / Arylsulfatase A 人细胞裂解液 (阳性对照) BSTFA[=N,O-双(*基硅基)三氟代乙酰胺](>95.0%(GC),用于气相色谱)

人肝细胞;HL-7702[L-02]N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide质量规格：>95.0%(GC)

MS4A1 Others Ferret 雪貂 CD20 / MS4A-1 人细胞裂解液 (阳性对照) TMS-咪唑(=N-*基硅基咪唑)(>98.0%(T))TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole)质量规格：>98.0%(T)

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。