PCR实验方法步骤：
衣阿华支原体探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：衣阿华支原体探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Mycoplasma iowae
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2 II型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL葡萄糖氧化酶，英文名或英文缩写：Glucose oxidase，级别：BR，50u/mg，规格：100克

NCI-N87 [N87]人细胞 HumanBqNZqNq R.G RqcG.cCS RqcG.ISO Rqc

IL12RB1 Others Human 人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-硝基本-N-乙酰-β-D-基半乳糖苷，英文名或英文缩写：GalNAc1-β-PNP，级别：BR，98%，规格：250克

人神经细胞HN邻硝基乙酰本，英文名或英文缩写：2'-nitnoacetanilide，级别：BR，规格：500毫克

NPC2 Others Human 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人细胞裂解液 (阳性对照) MEndoAgarLES 100g原装/500g原装 BD 273610
人结直肠腺癌细胞;HCT 116 [HCT116]GinsenosideRg2人参皂甙Rg225克BR

P19细胞，畸胎癌细胞 人感染HCV细胞,HuH7-HCV细胞 CL-0224SW579(人甲状腺鳞癌细胞 )5×106cells/瓶×2N,O-双三硅基酰安 BSc 10416-29-8

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E1(≥99.5%,GC) 1975-12-7 100ML 染色剂

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人细胞裂解液 (阳性对照) D-TyrosineD-β-对羟基本基酸5克BR，99%

肝实质细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)Linoleicacid 1g/5g/25g/100g原装 SIGMA L1268
EFNB2 Others Human 人 EphrinB2 / EFNB2 人细胞裂解液 (阳性对照) 氧化苦参碱(标准品)Oxymatrine质量规格：HPLC≥98%，标准品

长尾绿猴肾细胞;4647穿心莲内酯Andrographolide质量规格：>98%,BR

IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 穿心莲内酯（标准品）Andrographolide质量规格：HPLC≥98%，标准品

小肠内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)芹菜素Apigenin质量规格：HPLC≥97%,BR

猕猴皮肤细胞;MMS7 人胚胎性癌细胞，Cates-1B细胞 MDA-MB-453(癌细胞)芹菜素(标准品)Apigenin质量规格：HPLC≥98%，标准品
衣阿华支原体探针法荧光定量PCR试剂盒EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯氧乙酸钠(>98%,BR)Phenoxyaceti acid  salt质量规格：>98%,BR

人骨骼肌细胞总RNAHSkMC NA水杨酸苯酯(>98%,BR)Phenyl salicylate质量规格：>98%,BR

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人细胞裂解液 (阳性对照) 1脂酶A2Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom质量规格：比活性：>200U/mg，BC

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6对尼泊金丁酯钠(>98%,USP)p-Hydroxybenzoic acid butyl ester  salt质量规格：>98%,USP

MIApaca-2细胞，人细胞 人成纤维细胞,HT1080细胞 615小鼠瘤株;HP615尼泊金乙酯钠(>98.5%,BR)p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester  salt质量规格：>98.5%,BR

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。