PCR实验方法步骤：
犬血支原体探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：犬血支原体探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Mycoplasma haemocanis
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SMMC-7721细胞，细胞 人羊膜细胞系,Wish细胞 仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C113,5-双(3,5-二甲氧基苄氧基)苄醇(>94.0%(GC))质量规格：>94.0%(GC)3,5-Bis(3,5-dimethoxybenzyloxy)benzyl Alcohol

杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E73,5-双(3,5-二甲氧基苄氧基)苄溴(>97.0%(HPLC)(T))质量规格：>97.0%(HPLC)(T)3,5-Bis(3,5-dimethoxybenzyloxy)benzyl Bromide

HAVCR1 Others Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 3,5-双[3,5-双(3,5-二甲氧基苄氧基)苄氧基]苄溴(>97.0%(T))质量规格：>97.0%(T)3,5-Bis[3,5-bis(3,5-dimethoxybenzyloxy)benzyloxy]benzyl Bromide

人成纤维细胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg3',5'-二乙酰氧基苯乙酮(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)3',5'-Diacetoxyacetophenone

大鼠管状上皮细胞(RRTEpiC)(5×105)3',5'-二溴-4'-羟基苯乙酮(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone
HelaS3 Phosphomolybdicacidhydrate十二钼嶙酸25克GR，98%

5637人细胞 5637 human bladder cancer cells 1640+10% FBS苯甲脒 Benzamidine hydrochloride hydrate,≥99% 618-39-3 5G 通用试剂

TNF Protein Human 重组人 TNF-alpha / TNFA 蛋白糠基流醇 Furfuryl mqrccptcn 1998--

大鼠脊柱神经细胞(RSCMN)(1×106) UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌 HumanWORT肉汤shēng huà shì jì容量：2～8℃5毫升

肝星形细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)6009-70-7一水草酸铵Ammonium oxalate monohydrate
HAVCR1 Others Mouse 小鼠 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 一水脱氧胆酸钠 deoxycholate monohydrate质量规格：美国进口

真皮微内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)雷米普利拉-d5Ramiprilat-d5质量规格：美国进口

RPS6KA2 Others Human 人 RSK3 / RPS6KA2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 雷米普利-d3 Ramipril-d3质量规格：美国进口

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A雷米普利拉Ramiprilat质量规格：美国进口

VERO C1008细胞，非洲绿猴肾细胞 人胰腺腺泡上皮癌,HPAC细胞 CM-M087小鼠软骨细胞完全培养基100mL甲基4,7,8,9-四-O-乙酰-2-硫代-N-乙酰-a-D-神经氨酸甲酯Methyl4,7,8,9-tetra-O-acetyl-2-thio-N-acetyl-a-D-neuraminic acidmethylester质量规格：美国进口
犬血支原体探针法荧光定量PCR试剂盒Promocell C-28015 Mesenchymal Stem CellNeurogenic Differe. Medium, 间充质干细胞神经性分化培养基(即用型) 100ml吡罗昔康(标准品)Piroxicam质量规格：HPLC>98%,标准品

人内皮细胞HCAEC泊沙康唑Posaconazole质量规格：>99%

SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 泊沙康唑(标准品)Posaconazole质量规格：HPLC>98%,标准品

非洲绿猴肾细胞;CV-1利福昔明Riimin质量规格：>98.0%,可用于细胞培养

大鼠细胞;Y3-Ag 1.2.3 ，SPC-A-1细胞 B/c-ES细胞，BALB/c小鼠ES细胞利福昔明(标准品)Riimin质量规格：>98%,标准品

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。