产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：休斯新孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Neospora hughsi
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
休斯新孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
人小梁网细胞(HTMC)(5×105) 3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞 Mouse但马胶shēng huà shì jì容量：50毫克

人导管癌细胞;HCC38流醋软骨速内盐(+4℃) Chondroitin sulfctq c wo7ium sclt 39422-18-0

XCL1 Others Human 人 XCL1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 马来酸 Maleic acid (ReagentPlus, ≥99%) 110-16-7 100G 通用试剂

CM-R054大鼠子宫成纤维细胞完全培养基100mL基琼脂糖凝胶4Bshēng huà shì jì容量：100KU

BPH-1, 人细胞 B细胞,XJH细胞 PLC/PRF/5(人细胞)DNAMarkerⅠ,Wide 10/30 Gibco分装
人神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M17CN-11-3183录吡脲100克BR，98%

HEC-1-B细胞，子宫内膜腺癌细胞 人细胞(高分化),CNE1细胞 CL-0257BC-009(人癌细胞)5×106cells/瓶×22,4-二 2,4-Dihydroxybenzoic acid,97% 89-86-1 25G 通用试剂

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS3十七醋;珠光脂醋 Hqptcdqccnoic ccid;Hqptcdqcylic ccid 206-1-7

TNFRSF8 Others Human 人 CD30 / TNFRSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) pxenYLmetxYLSULFONYLFLUORIDE(PMSF)本 (PMSF)*白色粉末RTsigma

肺大动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)12259-92-6多硫化铵AMMONIUM POLYSULFIDE
HUAEC-c 人脐动脉内皮细胞(HUAEC) 500,000cells 肠内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)盐酸强力霉素/盐酸多西环素Doxycycline HCl质量规格：>97%,BR

原代神经元细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml盐酸强力霉素/盐酸多西环素（标准品）Doxycycline HCl质量规格：含量测定

SEMA4D Others Cynomolgus 食蟹猴 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) 维生素K3,甲萘醌Menadione质量规格：>98%,BR

EB病毒转化的人B细胞;KMY0926维生素K3,甲萘醌(标准品)Menadione质量规格：分析标准品

家猫肺细胞;FCA-L1 羊膜细胞，Ha Fe细胞 BaF3细胞，小鼠原B细胞株硝酸益康唑Econazole nitrate质量规格：>98%,BR
休斯新孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人细胞裂解液 (阳性对照) 白桦脂醇Betulin质量规格：>98%,BR

人肝细胞cDNAHH cDNA白桦脂醇(标准品）Betulin质量规格：HPLC≥98%，标准品

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) 白桦脂醛（标准品）Betulinaldehyde质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E白桦脂酸（标准品）Betulinic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品

HepG2.2.1.5细胞，人细胞 人星形细胞,U251细胞 大鼠肾系膜细胞;RMC白桦脂酸Betulinic acid质量规格：HPLC≥98%，BR