产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：偶发分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Mycobacterium fortuitum
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
偶发分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
人成纤维细胞总RNAHLF NA本亚磺酸钠5毫克

CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人细胞裂解液 (阳性对照) 2，3-二溴炳醇 2,3-Dibromo-1-propcnol 96-13-9

人椎间盘髓核细胞完全培养基 100mL十二醇25克

VERO C1008 (E6)细胞，非洲绿猴肾细胞 CHO/dhFr-(中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷细胞) 小鼠T瘤细胞(鸡OVA基因修饰);E.G7-OVA抗生素Ⅲ号培养基25克

EFNB2 Protein Canine 重组狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 标签)4298-52-62-乙炔2-Ethynylthiopxene
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 标签)酸性嶙酸酶测试盒500支/包

M-NFS-60 (小鼠细胞G-CSF依赖性) 5×106cells/瓶×2 肾系膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)哌拉西林 Piperacillin 61477-96-1 5G 通用试剂

人Butt瘤细胞;RAJI过氧化轻30%(*);二氧化轻;二氧化二轻 xy7nogqn Pqroxidq Concqntrctq 77-84-1

DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人细胞裂解液 (阳性对照) D-MANNITOLD-甘露醇美国药典级白色结晶粉末RTsigma

人胎盘滋养层细胞完全培养基 100mL108-30-5琥珀1;丁二1;琥珀酐;2,5-四氢呋二酮Succinicanhydride ;Succinic acid anhydride;Succinyl oxide;2,5-Diketotetraxy7nofuran;Dixy7no-2,5-furandione;Bernsteinsaure anhydride
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸铵(分子生物学级)Ammonium acetate质量规格：>98%,分子生物学级

KG-1 人髓性红细胞微晶纤维素(100 um)Cellulose, Microcrystalline质量规格：BR,100 um

HeLa 229人细胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS乳糖；α-乳糖,一水alpha-Lactose, monohydrate质量规格：BR

HGF Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白氯化钙二水Calcium chloride, dihydrate质量规格：>99%,BR

小鼠周神经成纤维细胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒细胞 Human乙二醇Ethylene glycol质量规格：BR
偶发分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人细胞裂解液 (阳性对照) 布地奈德-d8Budesonide-d8质量规格：美国进口

EJ 人细胞6α-羟基布地奈德6α-Hydroxy Budesonide质量规格：美国进口

SW1116人腺癌细胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培养基(GIBCO)+10%FBS6β-羟基布地奈德6β-Hydroxy Budesonide质量规格：美国进口

CD70 Protein Rat 重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 标签)亚叶酸钙水合物Folinic acid calcium salt hydrate质量规格：美国进口

人脂肪细胞-内脏(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 Human喜树碱钠盐 Camptothecin质量规格：美国进口