产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：伊氏李斯特菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Listeria ivanovii
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
伊氏李斯特菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
犬肾细胞;MDCK(NBL-2)VD2骨化醇5克IND

HRC-99细胞，人直肠腺癌细胞系 人眼脉络色素瘤细胞,C918细胞 小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA123-基-2--1-醇 3-Mqthyl-2-butqn-1-ol 226-8-1

HMy2.CIR(人B母细胞) 5×106cells/瓶×2Tributyl构缘酸三丁酯1克CP，99%

ACVRL1 Others Human 人 ALK-1 / ACVRL1 人细胞裂解液 (阳性对照) Iodobenzene本AR，99%

人脉络丛内皮细胞HCPEC2425-79-81，4-二缩水;二环氧9,4-putene7iol diglycidyl ;
LUM Others Human 人 LUM / Lumican / LDC 人细胞裂解液 (阳性对照) AEBSFAEBSF超级500MG30827-99-7COLD

间充质干细胞培养基MSCM-sfN-叔丁氧羰基-甘安醋 BOC-Glycinq 4230-0-2

GST Others Schistosoma japonicum 日本血吸虫 Glutathione S-ansferase / GST 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Barbitonewo7ium-xy7nochloricacidBuffersolution钠盐酸缓冲液1公斤AR

人胚肾二倍体细胞;HEK-2二本胺磺酸钡shēng huà shì jì容量：2～8℃10毫升

EL4. IL-2细胞，瘤细胞 人细胞,Loo细胞 CM-H037人平滑肌细胞完全培养基100mL吡罗红GSNA
神经元细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)月桂酰-DL-肉毒碱氯化物Lauroyl-DL-carnitine chloride质量规格：美国进口

TF-1细胞，人血液细胞 615小鼠状肺腺株,P615细胞 人少突胶质前体细胞裂解物HOPCL1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-胆碱1酸1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine质量规格：美国进口

NCI-H838(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2更昔洛韦钠盐Ganciclovir  Salt质量规格：美国进口

Caco-2(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0030Bcap-37(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A6(S)-更昔洛韦-5'-三1酸锂盐(S)-Ganciclovir-5’-triphosphate Lithium Salt质量规格：美国进口

猪内皮细胞;ZYM-SVEC01更昔洛韦-d5Ganciclovir-d5质量规格：美国进口
伊氏李斯特菌探针法荧光定量PCR试剂盒小鼠前低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFP胆红素Bilibubin质量规格：≥85%,BR

SK-BR-3细胞，腺癌细胞 人细胞,TE-1细胞 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1比伐卢定(TFA)Bivalirudin TFA质量规格：度大于98%

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B4比马素/贝美前列素Bimatoprost质量规格：度> 99%

CPE Others Human 人 CPE 人细胞裂解液 (阳性对照) 比马素/贝美前列素（标准品）Bimatoprost质量规格：HPLC>98%,标准品

人口腔表皮样癌细胞;KB盐酸平阳霉素Bleomycin A5 Hydrochloride 质量规格：BR,>85%(含Cu离子稳定剂)