PCR实验方法步骤：
克雷伯菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：克雷伯菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Klebsiella spp.
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
HPMEC-c 人肺微内皮细胞(HPMEC) 500,000cells 脑动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)3-去氮腺嘌呤质量规格：美国原装进口，97%3-Deazaneplanocin A HCl salt

神经元生长添加物NGS4-氧代维甲酰酚胺质量规格：美国原装进口3-Keto Fenretinide

CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-表米诺环素质量规格：美国原装进口4-Epi Minocycline

大鼠气管平滑肌细胞完全培养基 100mL牛磺脱氧胆酸钠质量规格：>97%,BRTaurodeoxycholic acid  salt

F81细胞，猫肾细胞 NCI-H838 [H838](人细胞) 散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ21rU亚1酰胺单体质量规格：>98%,BRrU Phosphoramidite
人肾透明细胞癌;Caki-1SaikosaponinB1柴胡皂甙B1100克BR，粘度200 mpe.s

NK-92细胞，人恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞 人细胞系,Hep-3B细胞 CL-0184PANC-1(人细胞)5×106cells/瓶×2N.N-二基-1.3-炳二安 3-Diqthylcminopropylcminq 104-78-9

中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24ProcyanidinB2原矢车菊素B2500ulAR，99%

SLAMF1 Others Human 人 CD150 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲基绿shēng huà shì jì容量：1公斤

平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)98-67-9固化剂4-xy7noxybenzenesulfonic acid
EB病毒转化的人B细胞;KM9801 人脉络膜细胞完全培养基 100mL紫花前胡苷（标准品）Nodakenin质量规格：HPLC≥98%，标准品

滋养层细胞培养基TM-prf紫蓳灵（标准品）Corynoline质量规格：HPLC≥98%，标准品

EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人细胞裂解液 (阳性对照) 紫云英苷（标准品）Astragaline质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠上皮细胞完全培养基 100mL棕榈酸（标准品）Palmitic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品

CV-1细胞，非洲绿猴肾细胞 HPAC(人细胞) CM-H010人小气道上皮细胞完全培养基100mL王不留行黄酮苷（标准品）Vaccarin质量规格：HPLC≥98%，标准品
克雷伯菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒Hepa 1-6(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎儿胸腺细胞株;HFT-8810 [HFT8810]地塞米,氟美（标准品）Dexamethasone质量规格：HPLC>98%,标准品

人卵巢;PA-1盐酸地尔硫卓Diltiazem HCL 质量规格：>98%,BR

NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸地尔硫卓(标准品)Diltiazem HCL 质量规格：含量测定，标准品

CL-0433RWPE-2(人正常细胞)5×106cells/瓶×2地美司钠Dimesna 质量规格：美国进口

SL-7细胞，胚肺细胞 人上皮细胞,RWPE2细胞 人上皮细胞;MCF-10A甲磺酸多拉司琼Dolasetron mesylate 质量规格：>98.5%,BR

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。