PCR实验方法步骤：
艰难梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：艰难梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Clostridium difficile
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
小鼠血小板生长因子(mouse PDGF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Mefenamic acid  中文名：甲灭酸  分子式：C15H15NO2 

小鼠血小板生长因子   英文名称：   plateler-derived growth factor   规格：   48T/96T   英文缩写：   PDGF  m-Nitrohydrocinnamic acid  1664-57-9  中文名：  分子式：C9H9NO4  度：98.0%  关键词： 

小鼠血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Momor-cerebroside I  中文名：  分子式：C48H93NO10 

小鼠血小板生成素(mouse TPO)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Neritaloside  中文名：  分子式：C32H48O10 

小鼠血小板生成素   英文名称：   Thromboietin   规格：   48T/96T   英文缩写：   TPO  Ethyl 2-(3-cyano-4-isobutoxyphenyl)-4-methyl-5-thiazolecarboxylate  160844-75-7  中文名：  分子式：C18H20N2O3S  度：98.0%  关键词：
2-(5-Chloro-2-phenoxyphenyl)acetic acid  中文名：  分子式：C14H11ClO3    EthidiumBromide(EB)   1ml(10mg/ml)

2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene  中文名：  分子式：C13H9ClOS    乙二醇   500ml

2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  中文名：  分子式：C10H14N2O6S3    Ethyleneglycol                 

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate  中文名：  分子式：C50H93NO9    雄激素结合蛋白   英文名称：   Androgen Binding Protein   规格：   48T/96T   英文缩写：   ABP

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol  中文名：  分子式：C42H85NO5    激活素A   英文名称：   Activin A   规格：   48T/96T   英文缩写：   Activin A
生存素 (survivin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Anthraflavic acid  中文名：二羟蒽醌  分子式：C14H8O4 

神经营养素3   英文名称：   Neuroophin-3   规格：   48T/96T   英文缩写：   -3  3-Hydroxychimaphilin  中文名：3-羟基梅笠草素  分子式：C12H10O3 

神经营养素 4(-4)   作用：   ELISA   规格：   96T   原装进口  3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  219921-94-5  中文名：  分子式：C23H37N3O5  度：98.0%  关键词： 

神经营养素 4(-4)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  3-Methoxyfuran  3420-57-3  中文名：  分子式：C5H6O2 

神经营养素 3(-3)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  3-Methoxyfuran  3420-57-3  中文名：  分子式：C5H6O2  度：99.0%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
艰难梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol  中文名：  分子式：C29H48O2  度：97.5%  兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Dregeoside Da1  中文名：  分子式：C42H70O15  度：%  兔内皮素-1(rabbit ET-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Dehydroadynerigenin digitaloside  中文名：  分子式：C30H42O8  度：97.0%  兔纤维蛋白原降解产物(rabbit FDP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Cardenolide B-1  中文名：  分子式：C30H44O8  度：98.0%  兔促卵泡素(rabbit FSH)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Drevogenin A  中文名：  分子式：C28H42O7  度：%  兔碱性成纤维生长因子(rabbit b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。