PCR实验方法步骤：
牛毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：牛毒探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Bovine Papular Stomatitis Virus(BPSV)
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
基因蛋白P53   英文名称：   aioncogene p53 protein   规格：   48T/96T   英文缩写：   P53  Qingyangshengenin 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranoside  1808159-02-5  中文名：  分子式：C56H84O20  度：92.0%  关键词：  孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

蛋白DKK3   英文名称：   Dikkopf 3   规格：   48T/96T   英文缩写：   DKK3  Qingyangshengenin  中文名：青阳参苷元  分子式：C28H36O8  度：97.5%

异育银鲫趋化因子CCL5   英文名称：   Freshwater fish Chemokine C-C motif ligand 5   规格：   48T/96T   英文缩写：   CCL-5  Pyrimethamine  中文名：乙胺嘧啶  分子式：C12H13ClN4  度：99.0%

异育银鲫球蛋白M   英文名称：   Freshwater fish Immunoglobulin M   规格：   48T/96T   英文缩写：   IgM  Pyrimethamine  58-14-0  中文名：乙胺嘧啶  分子式：C12H13ClN4  度：99.0%   

异育银鲫球蛋白D   英文名称：   Freshwater fish Immunoglobulin D   规格：   48T/96T   英文缩写：   IgD  Pyrimethamine  中文名：乙胺嘧啶  分子式：C12H13ClN4
Betamipron  中文名：倍他米隆  分子式：C10H11NO3    转基因植物Bar基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

Betamethasone  中文名：倍他米松  分子式：C22H29FO5    转基因植物Bar基因核酸检测试剂盒   48T

Benzyl nicotinate  中文名：烟酸苄酯  分子式：C13H11NO2    转基因植物TE基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T              

Benzyl L-(+)-mandelate  中文名：L-(+)-扁桃酸苄酯  分子式：C15H14O3    转基因植物PRSV基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

Benzyl cinnamate  中文名：肉桂酸苯甲酯  分子式：C16H14O2    转基因植物PRSV基因核酸检测试剂盒   48T
兔子表皮生长因子(EGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  中文名：  分子式：C29H46O2 

兔子抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole   中文名：  分子式：C12H14ClFN2O 

兔子白三烯B4elisa试剂盒   兔子白三烯B4试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子白三烯B4试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子白三烯B4试剂盒、兔子白三烯B4 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  5-Hydroxymethyl-2-furoic acid  中文名：5-羟甲基-2-糠酸  分子式：C6H6O4  度：%

兔子白三烯B4(LTB4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole   84163-13-3  中文名：  分子式：C12H14ClFN2O  度：98.0%  关键词： 

兔子白介素9(IL-9)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone  19131-13-6  中文名：  分子式：C14H24O8  度：98.0%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
牛毒探针法荧光定量PCR试剂盒5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  中文名：  分子式：C7H5ClN2O2  度：98.0%  豚鼠粘多糖   英文名称：   Mucopolysaccharide   规格：   48T/96T   英文缩写：   MLC

2-Amino-4'-fluorobenzophenone  中文名：  分子式：C13H10FNO  度：98.0%  兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Enalapril maleate  中文名：马来酸依那普利  分子式：C24H32N2O9  度：98.0%  兔子组织因子(TF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Pioglitazone   中文名：盐酸吡格列酮  分子式：C19H21ClN2O3S  度：98.0%  兔子组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Amlodipine besylate  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S  度：99.0%  兔子组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

操作流程：
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。