兔粒细胞集落刺激因子ELISA试剂盒操作步骤

兔粒细胞集落刺激因子ELISA试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

 SS 猪生长抑素 规格： 48T/96T
 GHRP-Ghrelin 猪生长激素释放肽ghrelin 规格： 48T/96T
 GHRP 猪生长激素释放多肽 规格： 48T/96T
 GH 猪生长激素 规格： 48T/96T
 EPI 猪肾上腺素 规格： 48T/96T
 HSP-90 猪热休克蛋白90 规格： 48T/96T
 HSP-70 猪热休克蛋白70 规格： 48T/96T
 HSP-40 猪热休克蛋白40 规格： 48T/96T
 HSP-20 猪热休克蛋白20 规格： 48T/96T
 NE 猪去甲肾上腺素 规格： 48T/96T
 GLUT2 猪葡萄糖转运蛋白2 规格： 48T/96T
 Prednisolone 猪泼尼松龙 规格： 48T/96T
 CORT 猪皮质酮/肾上腺酮 规格： 48T/96T
 Cortisol 猪皮质醇 规格： 48T/96T
 BNP 猪脑钠素/脑钠尿肽 规格： 48T/96T
 SGLT1 猪钠-葡萄糖共转运载体1 规格： 48T/96T
 eNOS-3 猪内皮型一氧化氮合成酶3 规格： 48T/96T
 eNOS 猪内皮型一氧化氮合成酶 规格： 48T/96T
 ET-1 猪内皮素1 规格： 48T/96T
 ET-1 猪内皮素1 规格： 48T/96T
 IgM 猪免疫球蛋白M 规格： 48T/96T
 IgG 猪免疫球蛋白G 规格： 48T/96T