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大麦内标准PKABA1基因探针法PCR试剂盒反应五要素

发表时间:2022-07-05
大麦内标准PKABA1基因探针法PCR试剂盒反应五要素:
产品仅用于科研参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

衔接蛋白α-Adaptin抗体
凋亡蛋白活性因子-1抗体(C端)
凋亡蛋白活性因子-1抗体(N端)
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体
载脂蛋白E抗体
淀粉样肽前体蛋白抗体
水通道蛋白-2抗体
血管紧张素原抗体
雄激素受体抗体
细胞死亡调节蛋白抗体(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制剂)
轴蛋白1抗体
自噬相关蛋白9B抗体
自噬相关蛋白12抗体
自噬相关蛋白13抗体
自噬相关蛋白3抗体
整合素样金属蛋白酶与凝血酶4型抗体
磷酸化活化复制因子2抗体
磷酸化APP(Tyr757)淀粉样肽前体蛋白抗体
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ATR抗体
去整合素样金属蛋白酶18抗体
活化转录因子6抗体
衔接蛋白β抗体
衔接蛋白γ/γ-Adaptin抗体
水通道蛋白-9抗体


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