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Ar Qual 感受态细胞操作方法

发表时间:2022-03-16
Ar Qual 感受态细胞操作方法:

1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
ASIC1/BNaC2/ASIC1A 酸敏感离子通道1抗体
ADAR1 (C-terminus) 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体(C端)
AF10 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体
ADCY1 腺苷酸环化酶1抗体
APC 腺瘤样息肉抗体
AGPAT1 溶血磷脂酰基转移酶抗体
ANKS3 锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体
phospho-ALK (Tyr1586) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体
ACADVL 酰基辅酶A脱氢酶很长链抗体
AMSH 信号转导衔接结合蛋白抗体
ASB3 锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体
Aurora C 有丝分裂激酶B抗体
Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷酸化Ack1抗体
Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷酸化Ack1抗体
Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗体
Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有丝分裂激酶A抗体
phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗体
Aurora A 有丝分裂激酶A抗体
AIM2 干扰素诱导蛋白AIM2抗体
Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗体
ABI2 肿瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体
ARL11 ADP核糖基化因子样11抗体
ARMCX3 ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体
ARMCX1 ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体
ARMCX2 ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体
Apg10 自噬相关蛋白10抗体
ACBD6 酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体
Aminoacylase 1 氨基酰化酶1抗体
Adipose Triglyceride Lipase 脂肪甘油三酯脂酶抗体
phospho-AMPK alpha-1 (Thr172) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体


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